sábado, 6 de diciembre de 2014

Uso de la autoclave



La autoclave es el equipo que se utiliza para esterilizar. Por esterilizar se entiende la destrucción o eliminación de toda forma de vida microbiana, incluyendo esporas presente en objetos inanimados mediante procedimientos físicos, químicos o gaseosos. En esta práctica se explicara con toda la claridad posible de  modo que los alumnos logren captar correctamente las funciones del autoclave y lo más importante lograr usarla correctamente, pero para ello es necesario conocer algunos conceptos básicos relacionados con la esterilización y sobre todo el uso dela autoclave, así si pues se espera lograr cumplir con las competencias establecidas para esta practica satisfactoriamente.

Partes de la autoclave











Métodos de esterilización
Métodos físicos
•Calor húmedo (en autoclave de vapor)
•Calor seco (en horno de esterilización)
Flama directa
•incineración
 Aire caliente
•Pasteurización
•Ebullición
•Vapor
•Tyndalización
•Radiación
• Radiación ionizante
•Radiación no ionizante(Radiación infrarroja y Radiación ultravioleta)
Métodos químicos

Alcoholes
•Etanol
•Alcohol isopropílico
Aldehídos
•Formol
•Glutaraldehído
Fenoles
•Fenol (Ácido carbólico)
•Xilenol
•Óxido de etileno
•Peróxido de hidrógeno

Como actividad nuestra profesora nos explico todo lo referente al procedimiento para esterilizar.(en esta practica solo la profesora explico y los alumnos tan solo escucharon).
La autoclave es un instrumento que ayuda a las personas en el laboratorio a trabajar con más limpieza y evita enfermedades debido a que desinfecta todos los materiales con los que se trabaja.

Determinación de cenizas en una muestra utilizando la mufla





   Los Hornos Mufla de Alta Temperatura para laboratorio, son fabricados por Acequilabs son utilizados en laboratorios para realizar pruebas de calcinamiento de muestras, incineración, tratamientos térmicos, entre otros. Estos Hornos o muflas están equipados con un control digital que se encarga de regular la temperatura. El control realiza una comprobación de temperatura ideal por medio del desarrollo del nuevo algoritmo de Control PID y alta velocidad de muestreo a 100ms, detecta la temperatura de la mufla por medio del sensor de temperatura y se ajusta a la condiciones que tenga programadas el control digital. El control que poseen muflas de Acequilabs es de un solo punto de ajuste, esto quiere decir, permite al usuario programar una temperatura en un punto deseado y solo debe esperar que la mufla alcance la temperatura programada.

 Los hornos mufla de alta temperatura de Acequilabs están pensados para aplicaciones múltiples como:

 • Carbonizar completamente sustancias orgánicas.
 •  Prueba de "Residuo de ignición" o"Cenizas"
 •De incineración.

 La práctica numero 12 tuvo como objetode aprendizaje:   el uso de la mufla y sus competencias fueron:
• Aplicar la técnica del uso de la Mufla y Determinar el extracto y cenizas de una muestra de vino, en cuanto a la primera competencia para cumplirla no hay problema alguno, sin embargo la segunda no se cumplirá al pie de la letra ya que se sustituirá el vino por tortilla, será lo mismo solo que con una materia diferente.
Fundamento
Extracto seco y cenizas. Se entiende por extracto seco la totalidad de las substancias restantes después del proceso de evaporación o destilación del vino. Entre estos se encuentran los carbohidratos, la glicerina, los ácidos no volátiles, combinaciones nitrogenadas, substancias tánicas y colorantes. Alcoholes superiores y minerales. La mayoría de los vinos contienen de 20 a 30 g/l de extracto. Los vinos tintos son más abundantes en extracto seco que los blancos; los vinos elaborados a partir de los mostos prensados, contienen más sustancias de extracto, que los vinos del mosto no prensado.
En los vinos atacados por bacterias avinagrados elaborados con flores, o sometidos a  la descomposición del ácido tartárico, y de la glicerina se produce un descenso muy marcado del extracto seco.
A los componentes minerales del vino se le denominan en conjunto cenizas, las cuales están constituidas por aniones, cationes inorgánicos, que son las substancias no comestibles del vino.

Actividad Preliminar

El profesor explico la técnica e identifico la importancia de la mufla en el laboratorio.

Material, substancias y equipo:

•Una cápsula de porcelana.
•Una pinza para porcelana.
•Pipeta graduada de 10 ml
•Un tripie
•Un mechero Bunsen
•Un Baño María.
•Pipeta
•10 ml de aceite de oliva.
•Agua destilada.
•25 ml de vino tinto.
•Balanza analítica
•Estufa
•Desecador
•Mufla
Parrilla eléctrica

Diagrama de flujo del uso de la mufla
Observaciones.
•Las cenizas resultantes de la calcinación de la tortilla desprenden un olor desagradable.
•Durante la práctica se trabajó en su mayor parte con ventanas abiertas debido al olor de las cenizas.
•Durante toda la práctica se trabajó con mucha precaución sobre todo cuando se usaban las pinzas de crisol.
El peso de la capsula de porcelana con cenizas dentro fue más alto que la capsula vacía.
•La mufla calcino la tortilla, y esto consistió simplemente en la eliminación del agua que contenía la muestra de tortilla
•El proceso es parecido a la deshidratación de frutas, solo que en este proceso se cambia el equipo (mufla y no estufa de secado), y por supuesto en este proceso el objetivo es calcinar la muestra eliminando el agua y en la deshidratación igual se elimina el agua pero no llega al extremo de calcinar la muestra.

Manipular la estufa de secado. Deshibratación de frutas

La estufa de secado es un equipo que se utiliza para secar y esterilizar recipientes de vidrio y metal en el laboratorio. Se identifica también con el nombre Horno de secado. Los Fabricantes han desarrollado básicamente dos tipos de estufa: las que operan mediante convección natural y las que operan mediante convección forzada. Las estufas operan, por lo general, entre la temperatura ambiente y los 350 °C. Se conocen también con en nombre de Poupinel o pupinel.

La deshidratación de frutas es un proceso muy recomendable para conservar las frutas durante todo el año y no solo durante la temporada de estas, aunque no conserva la misma forma y tamaño si conserva las vitaminas que al fin al cabo es lo más importante de las frutas. En esta practica se utilizo la estufa de secado para deshidratar una fruta en especifico(manzana).

  • La actividad de la practica consistió en la deshidratación de manzana. 

Cortar la manzana en pequeñas partes:

Colocar las rodajas de manzana en un plato forrado de papel aluminio. 


Colocar la manzana dentro de la estufa de secado para iniciar el proceso de deshidratación, para ello es necesario la permanencia de la manzana durante 2horas a 37°c aproximadamente.


La manzana debe estar de color dorado o café y esto será señal de que la deshidratación está completa.


Al concluir la práctica se concluyó que este proceso es una opción muy buena, económica  y saludable, ya que el proceso de deshidratación consiste en eliminar el agua de las frutas pero no las vitaminas, más que nada este proceso permite conservar frutas durante todo el año y no solo durante la temporada de esta

Uso y mantenimiento del baño María

Antes de usar el Baño María se debe verificar, que el mismo
se encuentre limpio y que se encuentren instalados los
accesorios que van a utilizarse: Para su uso se toman en
cuenta los siguientes pasos:
1. Llenar el baño de María con el fluido que habrá de utilizarse para mantener uniforme la temperatura –agua o aceite–. Verificar que, colocados los recipientes que van a calentarse, el nivel del mismo se encuentre entre 4 y 5 cm del borde superior del tanque. 
•2. Instalar los instrumentos de control que, como termómetros y agitadores, puedan ser requeridos. Utilizar los aditamentos de montaje que, para el efecto, suministran los fabricantes. Verificar la posición del bulbo del termómetro o de la sonda térmica, para asegurar que las lecturas sean correctas.
•3. Si se utiliza agua como fluido de calentamiento, verificar que la misma sea limpia. Algunos fabricantes recomiendan añadir productos que eviten la formación de algas.
4.Colocar el interruptor principal, en la posición de encendido. Algunos fabricantes han incorporado controles con microprocesadores que inician rutinas de auto verificación, una vez que se acciona el interruptor de encendido.
•5. Seleccionar la temperatura de operación. Se utilizan el botón de Menú Nº 2 y los  botones para ajuste de parámetros.
•6. Seleccionar la temperatura de corte –en aquellos baños que disponen de este control Este es un control de seguridad que corta el suministro eléctrico, si se sobrepasa la temperatura seleccionada. Esta se selecciona también a través del botón de Menú y se controla con los botones de ajuste de parámetros.
•7. Evitar utilizar el baño de María con sustancias como las que se indican a continuación:

a) Blanqueadores.
b) Líquidos con alto contenido de cloro.
c) Soluciones salinas débiles como cloruro de sodio, cloruro de calcio o compuestos de cromo.
d) Concentraciones fuertes de cualquier ácido.
e) Concentraciones fuertes de cualquier sal.
f) Concentraciones débiles de ácidos hidroclóricos, hidrobrómico, hidroiódico, sulfúrico o crómico.
g )Agua desionizada, pues causa corrosión y también perforaciones en el acero inoxidable.
ADVERTENCIA
Antes de efectuar cualquier actividad de mantenimiento, desconectar el equipo de la toma de alimentación eléctrica.
•Los baños de María son equipos que no son muy exigentes desde el punto de vista de mantenimiento. Las rutinas recomendadas están principalmente enfocadas a la limpieza de los componentes externos. A continuación, se señalan las rutinas más comunes. Limpieza. Frecuencia: Mensual.
Apagar y desconectar el equipo. Esperar a que el mismo se enfríe para evitar riesgos de quemaduras accidentales.
Extraer el fluido utilizado para el calentamiento. Si es agua, puede verterse a un sifón. Si es aceite, recolectar en un recipiente con capacidad –volumen– adecuada.
Retirar la rejilla de difusión térmica que se encuentra ubicada en el fondo del tanque.
Limpiar el interior del tanque con un detergente suave. Si se presentan indicios de corrosión, existen en el mercado sustancias para limpiar el acero inoxidable. Frotar suavemente con esponjas sintéticas o equivalentes. Evitar la utilización de lana de acero para remover manchas de óxido, debido a que las mismas dejan partículas de acero que podrían acelerar la corrosión.
Evitar doblar o golpear el tubo capilar del control de temperatura que generalmente se encuentra ubicado en el fondo del tanque.
•Limpiar con agua limpia el exterior y el interior del baño de María
Actividad 
•1. Se lleno el baño de María con agua y se verifico que, colocados los recipientes que se calentaron, que el nivel del mismo se encontraran entre 4 y 5 cm del borde superior del tanque.

•2. Se Instalaron los instrumentos de control que, como termómetros, pueden ser requeridos. Se utilizaron los aditamentos de montaje que, para el efecto, suministran los fabricantes. Se verifico la posición del bulbo del termómetro o de la sonda térmica, para asegurar que las lecturas fueran correctas.
•3. Se Midió con una pipeta 5 ml de clara de huevo y se   introdujo en la bandeja difusora.
•4. Se ajusto la temperatura,  y se procedió a cerrar la cubierta.
•5. Se Ajusto con el botón la temperatura deseada, según la explicación del profesor.
6.Se Cerro la cubierta y se  procedió a esperar de 20 a 30 minutos.


Cortado, doblado, estirado y pulido del vidrio con el Mechero Bunsen

En esta practica aprendimos todo lo referente al Cortado, Doblado, Estirado y Pulido del Vidrio con el Mechero Bunsen, esta practica tiene como única finalidad el aprender a realizar correctamente esta técnicas que su resultado es indispensable para armar equipos que llevan como material algún tubo de vidrio que es indispensable para su correcta realización.
  • En esta practica todo los procedimientos realizados se llevaron a cabo con la ayuda del mechero bunsen y para utilizarlo primero fue necesario conocer todo lo referente a el.

Mechero de Bunsen
 dispositivo que se utiliza mucho en los laboratorios debido a que proporciona una llama caliente, constante y sin humo. Debe su nombre al químico alemán Robert Wilhelm Bunsen, que adaptó el concepto de William Faraday del quemador de gas en 1855 y popularizó su uso.
La llama del mechero es producida por la reacción química de dos gases: un gas combustible (propano, butano, gas natural) y un gas comburente (oxígeno, proporcionado por el aire). El gas que penetra en un mechero pasa a través de una boquilla cercana a la base del tubo de mezcla gas-aire. El gas se mezcla con el aire y el conjunto arde en la parte superior del mechero. 
El Mechero Bunsen está constituido por un tubo vertical que va enroscado a un pie metálico con ingreso para el flujo del combustible, el cual se regula a través de una llave sobre la mesa de trabajo. En la parte inferior del tubo vertical existen orificios y un anillo metálico móvil o collarín también horadado. Ajustando la posición relativa de estos orificios (cuerpo del tubo y collarín respectivamente), los cuales pueden ser esféricos o rectangulares, se logra regular el flujo de aire que aporta el oxígeno necesario para llevar a cabo la combustión con formación de llama en la boca o parte superior del tubo vertical como se puede identificar en la Figura A.
Precauciones en el uso del Mechero.
•Verificar que todas las partes que constituyen el mechero estén completas por ejemplo la manguera de hule látex que no esté desgastada o perforado por tanto uso, si es así cambiarla en forma inmediata antes de proceder a conectar el mechero.
•Antes de utilizar el mechero, asegúrese que la manguera de hule esté bien conectada.
•El mechero deberá ser manipulado por una sola persona.
•Encienda el cerillo antes de abrir la llave que suministra el gas. Nunca coloque el cerillo encendido sobre cono frío del mechero porque nunca encenderá, sino que hará una contra explosión interna en el cuello del mechero y se escuchará un ruido muy característico.
•Nunca enrolle la manguera de hule alrededor del mechero.
Como siguiente paso se leyó con mucha concentración los pasos y conceptos de los procesos a realizar en esta practica.
Cortado de tubo de vidrio
Un tubo de vidrio, se corta de la siguiente manera:
a. Coloca horizontalmente un tubo sobre la mesa del laboratorio y haz una hendidura profunda pasando una lima triangular metálica en el sitio en que se va a cortar.
b. Toma el tubo firmemente en las manos con los pulgares muy cerca de la hendidura y con ella hacia tu lado inverso.
c. Mantén firme los pulgares, corte el tubo por presión Hacia fuera (empuja).
Aplicación: Corta una tubo de vidrio de medida  ___ cm de largo según tus cálculos de medida que planeaste para hacer tu conexión .y después prepara el ajustador o tapón de hule horadado (sino está horadado pide a tu profesor el horadador y realízalo  si tienes duda pregunta a tu profesor como hacerlo).
Los extremos de los tubos cortados anteriormente quedarán con bordes cortantes por lo que hay que pulirlos al fuego, para evitar lesionarse.
Pulido

Para pulir los filos del corte reciente, mantener un extremo del tubo de vidrio en la parte más caliente de la llama del mechero y mantener inclinado de preferencia el tubo y  girar este a un lado y a otro, hasta que los salientes se redondeen. No operar a la llama excesivo tiempo a fin de evitar que el extremo del tubo empiece a cerrarse (disminución de su diámetro).
Precaución: el vidrio caliente tiene el mismo aspecto que el vidrio frío. Poner el vidrio caliente sobre una tela metálica para enfriarlo, y entonces pulir a la llama el otro extremo del tubo.
Doblado vidrio
1. Calentar el tubo de vidrio en la zona más caliente de la llama no luminosa del mechero, girándolo a un lado y otro de la llama del mechero, de preferencia utilizar una mariposa, como indican las figuras 1,2, y 3.
2. Continuar calentando el tubo hasta que el vidrio se ponga completamente blando y comience a combarse al girarlo.
3. Quitar el tubo de la llama del mechero y doblar alzando los extremos, para obtener el ángulo esperado, no olvidar consultar su diseño de trabajo que tendrá que tener la  medida exacta y ángulo calculado
4. Como el vidrio caliente tiende a encorvarse, doblándolo de esta forma se conseguirá  una curva más uniforme, ¡IMPORTANTE ¡ procura que no se doble solo.
Nota: el doblado debe quedar uniformemente curvado, sin partes aplanadas ni retorcidas.



 Estirado
Calentar el tubo de vidrio en la llama del mechero, en la posición indicada en la figura  No.5, girando el vidrio en la parte más caliente de la llama. Dejar que el tubo se haga un poco más corto a medida que el vidrio funda y las paredes adquieran aproximadamente dos veces su espesor primitivo. Después que el vidrio se haya puesto completamente blando y grueso, separar de la llama y estirar hasta alcanzar el diámetro deseado (punta de tobera). Poner el vidrio caliente sobre una tela metálica para enfriar. Cortar el vidrio hacia el centro de la porción estirada y pulir los extremos. Con ayuda de tu profesor diseña una pipeta.

Microscopía (Descrípcion del microscopio compuesto, manejo y cuidado)

Un microscopio compuesto tiene más de una lente objetiva. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en láminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio óptico común está conformado por tres sistemas:
  • El sistema mecánico está constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los instrumentos a observar.
  • El sistema de iluminación comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que producen las ranuras de luz.
  • El sistema óptico comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".


Parte mecánica del microscopio
Esquema de un micoscopio óptico.
La parte mecánica del microscopio comprende el pie, el tubo, el revólver, el asa, la platina, el carro y el tornillo micrométrico. Estos elementos sostienen la parte óptica y de iluminación; además, permiten los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.
  • El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular.
  • La columna o brazo: llamada también asa, es una pieza en forma de C, unida a la base por su parte inferior mediante una bisagra, permitiendo la inclinación del tubo para mejorar la captación de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se adapta al pie.
  • El tubo: tiene forma cilíndrica . El tubo se encuentra en la parte superior de la columna, enfoca el objeto mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos.
  • El tornillo macrométrico o macroscopico: girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizándose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido de la preparación.
  • El tornillo micrométrico o microscopico: mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.
  • La platina: es una pieza metálica plana en la que se coloca el objeto que se va a observar. Presenta un orificio, en el eje óptico del tubo, que permite el paso de los rayos luminosos a la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros casos puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
  • Las pinzas: son dos piezas metálicas que sirven para sujetar el objeto. Se encuentran en la platina.
  • El revólver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, lo que se nota por el ruido de un piñón que lo fija.

Sistema óptico
Es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Está formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego amplía.
  • El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la cercanía de la pieza con el ojo del observador. Tiene como función aumentar la imagen formada por el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus poderes de aumento van desde 5X hasta 20X. Existen oculares especiales de potencias mayores a 20X y otros que poseen una escala micrométrica; estos últimos tienen la finalidad de medir el tamaño del objeto observado.
  • Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revólver y producen el aumento de las imágenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparación que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersión.
    • Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que producen, la abertura numérica y otros datos. Así, por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromático, su aumento 40 y su apertura numérica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El número de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.
    • El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno o dos círculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.


Sistema de iluminación
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:
  • Fuente de iluminación: se trata clásicamente de una lámpara incandescente de tungsteno sobrevoltada; en versiones más modernas con leds. Por delante de ella se sitúa un condensador (una lente convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite controlar el diámetro de la parte de la preparación que queda iluminada, para evitar que exceda el campo de observación produciendo luces parásitas.
  • El espejo: necesario si la fuente de iluminación no está construida dentro del microscopio y ya alineada con el sistema óptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos. Suele tener dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de preferencia con iluminación artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los modelos más modernos no poseen espejos sino una lámpara que cumple la misma función que el espejo.
  • Condensador: está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación, formando un cono de luz con el mismo ángulo que el del campo del objetivo. El condensador se sitúa debajo de la platina y su lente superior es generalmente planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la preparación cuando se usan objetivos de gran abertura (los de mayor ampliación); existen condensadores de inmersión, que piden que se llene con aceite el espacio entre esa lente superior y la preparación. La abertura numérica máxima del condensador debe ser al menos igual que la del objetivo empleado, o no se logrará aprovechar todo su poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo, bajándose para su uso con objetivos de poca potencia.
  • Diafragma: el condensador está provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace cerrándolo más de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolución del sistema óptico.

Manejo del Microscopio

Observación a través del microscopio: Para el uso correcto del mismo es importante y necesario seguir los pasos que se describen a continuación.
Iluminación
Prenda el microscopio con el objetivo de menor aumento (10X), observe por el ocular y ajuste la luz hasta lograr una iluminación uniforme en el campo de visión. El condensador debe estar cerca de la platina y el diafragma abierto.
Enfoque
Actualmente los microscopios poseen lentes parafocales, es decir, tienen un sistema sincronizado de enfoque a diferentes aumentos. Así una vez enfocada la preparación a menor aumento, queda enfocada al utilizar el objetivo de mayor aumento. Para un ajuste mayor, se debe mover ligeramente el tornillo micrométrico. Por el contrario, los microscopios antiguos tenían lentes no parafocales y se corría el riesgo que al girar el revólver y pasar de una lente de menor aumento a una lente de mayor aumento, ésta última tropezara con la preparación.
Para el enfoque el procedimiento técnico es el siguiente:

Enfoque visual a menor aumento
Se coloca la preparación centrada en la platina, mirando por fuera, se acerca el objetivo de menor aumento a la lámina, girando el tornillo macrométrico hasta que quede a una distancia ligeramente menor de la distancia de trabajo.
Ahora se enfoca girando el tornillo macrométrico hasta ver la imagen del preparado. Una vez obtenida la imagen, complete el enfoque con el tornillo micrométrico o de ajuste fino. Si es necesario, gradúa la intensidad luminosa ajustando la apertura del diafragma y la altura del condensador. Evite sobre iluminación.
Enfoque visual a mayor aumento
Una vez observada la preparación a menor aumento, pase a posición de trabajo el objetivo de mayor aumento, girando suavemente el revólver. Para el caso de microscopio con lentes parafocales, queda enfocado automáticamente y se afina el enfoque con el tornillo micrométrico. Si el microscopio posee lentes no parafocales, la lente puede tropezar con la preparación, entonces levante el objetivo empleando el tornillo macrométrico y proceda a acercar el objetivo a la preparación 8 menos de 1mm observando por fuera y no a través del ocular. Enfoque la imagen con el tornillo micrométrico alejando siempre el objetivo de la preparación.
Enfoque visual con el objetivo de inmersión (100X)
Coloque una gota muy pequeña de aceite de inmersión sobre la laminilla cubreobjetos (si la preparación es un extendido fijado, coloque la gota de aceite de inmersión directamente sobre la lámina) y proceda como en el caso anterior, teniendo en cuenta que la distancia de trabajo es menor con el objetivo de inmersión y se requiere mayor intensidad de luz.
Precaución
Una vez realizada la observación limpia con papel de lentes el objetivo de inmersión pues al solidificarse se puede dañar la lente. Para lo anterior, tenga cuidado de girar el revólver directamente al objetivo de menor aumento sin devolverlo ya que mojaría el objetivo de mayor aumento con aceite de inmersión. Finalmente retira la lámina del microscopio.
Recomendaciones para el cuidado del microscopio
Al limpiar las partes ópticas utiliza solo papel de lentes y xilol no use pañuelo. En caso de no lograr una limpieza apropiada, solicite ayuda al profesor. En las preparaciones de montajes húmedos o coloreados no debe quedar líquido sobre la laminilla o debajo de la lámina. Las preparaciones no deben tocar la lente de los objetivos. Al colocar o retirar una lámina, el objetivo de menor aumento debe estar en posición de trabajo. Cuando utilice micro preparados  fíjese que la laminilla quede en la cara superior de la lámina, es decir mirando hacia el objetivo. Mantenga seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, séquela utilizando panola o papel absorbente. Limpie siempre el objetivo de inmersión después de usarlo, solo con papel para lente o papel de arroz. No debe retirar ningún componente óptico o mecánico del microscopio, ni intercambiar los oculares. Una vez utilizado, el microscopio debe quedar limpio y con el objetivo de menor aumento en posición de trabajo. Para transportar el microscopio tómelo del brazo del aparato con una mano y con la otra de la base, siempre en posición vertical  pues al voltearlo se pueden caer las lentes y el espejo.
Realizar un montaje húmedo de una letra pequeña de un periódico; Haga el montaje de la siguiente forma:
Sobre una lámina porta objetos limpia, coloque una gota de agua. Dentro de la gota de aguas ponga la letra impresa. Acerque la laminilla en posición oblicua y apoyando una arista sobre la lámina al lado de la gota, déjela caer suavemente sobre esta. La preparación debe quedar totalmente cubierta y embebida en el líquido. Evite el exceso de agua colorante en preparaciones coloreadas, en los bordes de la laminilla o sobre esta retire el sobrante con papel absorbente. Antes de colocar la lámina sobre la platina fíjese que esté completamente seca en la parte inferior. Si usted ve que la preparación se está deshidratando puede agregar agua en forma de gota y al lado de la laminilla.
Observar el montaje a través del microscopio
Inicie sus observaciones con el objetivo de menor aumento, el cual le brindará una imagen panorámica amplia y con mayor profundidad de foco. Luego pase a mayor aumento y precise las estructuras. Siéntese en posición correcta y cómoda para observar y dibujar. Acostúmbrese  a observar con ambos ojos abiertos eso le evitará la fatiga ocular.

Normas básicas para el cuidado del microscopio


Al ser el microscopio un aparato de precisión y, por lo tanto, delicado, es muy conveniente asegurar un buen funcionamiento atendiendo siempre a las siguientes normas:
    1. Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos manos, sujetándolo por el brazo con una mano y por el pie con la palma de la otra.
    2. Una vez colocado el microscopio en su sitio, no debe moverse hasta que finalice la práctica. Cuando se vaya a cambiar de observador se debe mover él y no el microscopio.
    3. Mover siempre suave y lentamente cualquier elemento del microscopio.
    4. Nunca poner los dedos en las lentes del ocular ni del objetivo. Si se ensucian dichas lentes se limpiarán con un paño suave de algodón, sin utilizar ningún disolvente.
    5. No sacar de su sitio el ocular ni los objetivos, a no ser que vayan a ser sustituidos, en cuyo caso la operación debe realizarse lo más rápidamente posible, para evitar la entrada de polvo.
    6. Asegurarse de que el portaobjetos está bien seco cuando va a ser colocado sobre la platina.
    7. Al enfocar, sobre todo con los objetivos de mayor aumento, hay que evitar que el extremo del objetivo choque con la preparación. Para ello acercaremos el objetivo a la preparación mirando lateralmente y luego, mirando ya a través del ocular, enfocamos alejando el objetivo.